產(chan)品名稱(cheng)：豬(zhu)調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)ELISA試(shi)劑盒

                                                       96T       僅供(gong)體外(wai)研究(jiu)使(shi)用，不用於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)!

豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)ELISA試(shi)劑盒

本(ben)試劑盒運用雙抗體(ti)夾(jia)心ELISA法定量測(ce)定(ding)豬(zhu)血(xue)清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻漿、細胞裂解液(ye)、細(xi)胞培養上清(qing)液(ye)和(he)其(qi)他生(sheng)物液(ye)體(ti)中(zhong)豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)含(han)量。

 檢測(ce)範(fan)圍

3.125-200ng/mL

 *低檢(jian)測(ce)限(xian)

1.15ng/mL

 實(shi)驗原理

將豬(zhu)調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)抗體(ti)包(bao)被於96孔微孔板(ban)中(zhong)，制成(cheng)固相(xiang)載體，向微孔中(zhong)分別(bie)加入標(biao)準品或標本(ben)，其(qi)中(zhong)的(de)豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)與連接(jie)於固相(xiang)載體上的(de)抗體(ti)結(jie)合(he)，然(ran)後加入(ru)生(sheng)物素化(hua)的(de)豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)抗體(ti)，將未(wei)結(jie)合(he)的(de)生(sheng)物素化(hua)抗體(ti)洗(xi)凈後，加入(ru)HRP標記的(de)親(qin)和素，再(zai)次徹(che)底(di)洗滌(di)後加入(ru)TMB底(di)物顯(xian)色(se)。TMB在過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催化(hua)下轉化成(cheng)藍(lan)色，並(bing)在(zai)酸的(de)作用下轉化成(cheng)*終(zhong)的(de)黃色(se)。顏色(se)的(de)深淺(qian)和樣(yang)品中(zhong)的(de)豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)呈正(zheng)相關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀在450nm波(bo)長下測(ce)定(ding)吸(xi)光(guang)度(O.D.值)，計算樣(yang)品濃度。

 試(shi)劑盒內容

豬(zhu)調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)ELISA試(shi)劑盒需(xu)自(zi)備(bei)的(de)設(she)備(bei)及(ji)試(shi)劑

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的(de)酶(mei)標(biao)儀(建議(yi)儀器(qi)使用前提前預(yu)熱)

2.         單(dan)道(dao)或多道(dao)微量加液(ye)器(qi)及吸(xi)頭(tou)

3.         稀(xi)釋(shi)樣品的(de)EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或去離(li)子(zi)水(shui)

5.         吸水(shui)紙(zhi)

6.         盛放(fang)洗(xi)液(ye)的(de)容器(qi)

 試劑盒的(de)儲存(cun)及(ji)有(you)效期(qi)

1.         未(wei)開(kai)封(feng)的(de)試劑盒：所有(you)試劑均按試劑瓶標簽(qian)上(shang)所(suo)示保存(cun)。請(qing)註(zhu)意(yi)，收到試(shi)劑盒後請盡(jin)快(kuai)將TMB 洗滌(di)液(ye)，終(zhong)止液(ye)保(bao)存(cun)於4℃，其(qi)他試(shi)劑保存(cun)於-20℃。

2.         使用後的(de)試劑盒：剩(sheng)余(yu)試劑仍需(xu)按(an)照(zhao)試(shi)劑瓶標簽(qian)所(suo)示(shi)的(de)溫(wen)度保存(cun)，開(kai)封(feng)後的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)要(yao)加(jia)幹(gan)燥(zao)劑後密封(feng)保存(cun)於-20℃，避(bi)免潮濕(shi)。

註意(yi)：

試劑盒內酶(mei)標(biao)條(tiao)可(ke)拆(chai)卸(xie)，按實(shi)驗需(xu)求可(ke)分多(duo)次(ci)使用；使用後的(de)剩(sheng)余(yu)試劑盒建議在(zai)**實(shi)驗後 1個月內使(shi)用完畢(bi)。產(chan)品過(guo)期(qi)時(shi)間以(yi)盒(he)子(zi)上(shang)的(de)標簽(qian)為(wei)準，保(bao)質期(qi)內(nei)所(suo)有(you)組(zu)分都(dou)確(que)保是(shi)穩(wen)定的(de)。

豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)ELISA試(shi)劑盒標本(ben)的(de)采集與保存(cun)

1.         血(xue)清(qing)：

將收集於血清(qing)分離(li)管(guan)的(de)全血(xue)標本(ben)在室(shi)溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 小時(shi)或 4^oC 過(guo)夜，然(ran)後 1000×g 離(li)心 20 分鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)，或將上清(qing)置於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免反復(fu)凍(dong)融。

2.         血(xue)漿：

用 EDTA 或肝素作為(wei)抗凝(ning)劑采集標本(ben)，並將標本(ben)在采集後的(de) 30 分鐘(zhong)內於 2-8^oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)，或將上清(qing)置於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免反復(fu)凍(dong)融。

3. 組(zu)織(zhi)勻漿：

1） 取(qu)適量組(zu)織(zhi)塊(kuai)，於預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清(qing)洗去除血(xue)液(ye)，稱(cheng)重(zhong)後備(bei)用（組(zu)織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先剪碎(sui)後再(zai)勻漿(jiang)）；

2） 可(ke)同(tong)時(shi)選用多種(zhong)勻漿(jiang)方(fang)法達到較(jiao)好(hao)的(de)破(po)碎效果(guo)：首先將組(zu)織(zhi)塊(kuai)移入玻璃勻(yun)漿器(qi)，加入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進(jin)行充(chong)分研磨(mo)，該(gai)過(guo)程需(xu)在(zai)冰上進行(xing)（有(you)條件(jian)實(shi)驗室可(ke)選(xuan)用機(ji)器(qi)勻漿(jiang)）；得(de)到(dao)的(de)勻漿(jiang)液(ye)可(ke)再(zai)利(li)用超聲(sheng)破(po)碎或反復(fu)凍(dong)融 進壹(yi)步處理（超聲(sheng)破(po)碎過(guo)程中(zhong)註意冰浴降溫(wen)；反復(fu)凍(dong)融法可(ke)重(zhong)復(fu)2 次）。

3） 將制備(bei)好(hao)的(de)勻漿(jiang)液(ye)於5000×g 離(li)心5 分鐘(zhong)，留取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)。

4. 細胞裂解液(ye)：

1）貼(tie)壁細胞需(xu)要(yao)先用胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua)，離(li)心收(shou)集細胞（懸(xuan)浮細(xi)胞可(ke)直(zhi)接離(li)心收(shou)集）；

2）將收集到的(de)細胞用冷PBS 洗(xi)3 次；

3）物(wu)理(li)方(fang)法裂解細胞（可(ke)先超聲(sheng)破(po)碎細胞，再(zai)反復(fu)凍(dong)融）：

i 超聲(sheng)破(po)碎：取(qu)適量PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，用壹(yi)定(ding)功率(lv)的(de)超聲(sheng)波(bo)處理細胞懸(xuan)液(ye)，使(shi)細(xi)胞急劇(ju)震蕩(dang)破(po)裂。

ii 反復(fu)凍(dong)融：將待破(po)碎的(de)細胞在-20 ^oC 以(yi)下冰凍(dong)，室溫(wen)融解，反復(fu)3 次，使(shi)細(xi)胞溶脹(zhang)破(po)碎。

4）將標本(ben)於2-8 ^oC 1500×g 離(li)心10 分鐘(zhong)，收集上清(qing)備(bei)用。

5. 細胞培養上清(qing)或其(qi)它生(sheng)物標(biao)本(ben)：

請(qing) 1000×g 離(li)心 20 分鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)，或將上清(qing)置於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免反復(fu)凍(dong)融。

註(zhu)意：

1.         以(yi)上(shang)標本(ben)均需(xu)密(mi)封(feng)保存(cun)，4^oC保存(cun)應(ying)小(xiao)於1周(zhou)，-20^oC不應(ying)超(chao)過(guo)1個(ge)月，-80^oC不應(ying)超(chao)過(guo)2個(ge)月。

2.         標(biao)本(ben)使用前應緩慢(man)均衡至室(shi)溫(wen)，不應(ying)加(jia)熱(re)使(shi)之(zhi)融解。

3.         實(shi)驗前紅(hong)細(xi)胞裂解液(ye)必須用標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)。

豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)ELISA試(shi)劑盒試劑準備(bei)

1.         使(shi)用前將所有(you)的(de)試劑和標本(ben)緩慢(man)均衡至室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試劑不能(neng)直(zhi)接(jie)在(zai)37oC溶(rong)解。

2.         標準(zhun)品(凍(dong)幹(gan)品)：每瓶(ping)標(biao)準品加入(ru)標(biao)準品稀(xi)釋(shi)液(ye)1mL，蓋好(hao)後室溫(wen)靜置大(da)約(yue)10分鐘(zhong)，同時(shi)反復(fu)顛倒(dao)/搓(cuo)動以(yi)助(zhu)溶解，其(qi)濃度為(wei)200ng/mL。準備(bei)7個(ge)稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品的(de)EP管(guan)，每(mei)個(ge)EP管(guan)中(zhong)加入150μL的(de)標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)，如(ru)圖(tu)所示(shi)依次倍(bei)比稀(xi)釋(shi)成(cheng)不同(tong)的(de)梯度， 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作為(wei)空(kong)白(bai)孔(kong)。為(wei)保證(zheng)實(shi)驗結(jie)果有(you)效性，每次(ci)實(shi)驗請使(shi)用新的(de)標準(zhun)品溶液(ye)。

3.         濃洗滌(di)液(ye)：用580mL蒸餾(liu)水或去離(li)子(zi)水(shui)將20mL濃洗(xi)滌液(ye)稀(xi)釋(shi)至600mL，進行(xing)30倍(bei)稀(xi)釋(shi)。

標本(ben)處理(li)

1.         本(ben)公司(si)只對試(shi)劑盒本(ben)身負責(ze)，不對(dui)因使用該試(shi)劑盒所造成(cheng)的(de)樣本(ben)消耗負(fu)責，請(qing)使用者使(shi)用前充(chong)分考(kao)慮(lv)到(dao)樣本(ben)的(de)可(ke)能(neng)使用量，預(yu)留充(chong)足的(de)樣本(ben)。

2.         實(shi)驗前應預(yu)測(ce)標(biao)本(ben)含(han)量，如果標(biao)本(ben)濃度過(guo)高(gao)，應(ying)對(dui)標本(ben)進行(xing)稀(xi)釋(shi)，使稀(xi)釋(shi)後的(de)標本(ben)符(fu)合(he)試(shi)劑盒的(de)檢測(ce)範(fan)圍，計算時(shi)再(zai)乘以(yi)相(xiang)應的(de)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)。

3.         若所(suo)檢(jian)樣本(ben)不包(bao)含(han)在(zai)說明(ming)書(shu)所列樣本(ben)之中(zhong)，建議進行預(yu)實(shi)驗驗證(zheng)其(qi)有(you)效性，並註(zhu)意(yi)留存(cun)樣(yang)本(ben)。

4.         使用化學(xue)裂(lie)解液(ye)制(zhi)備(bei)的(de)組(zu)織(zhi)勻漿或細胞提取(qu)液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)由於某些化(hua)學(xue)物(wu)質的(de)引入(ru)導致  ELISA實(shi)驗結(jie)果偏(pian)差。

5.         若樣(yang)本(ben)為(wei)細胞培養上清(qing)，因該類樣本(ben)幹(gan)擾因素 較(jiao)多，如：細(xi)胞狀態、細胞數量、采樣時(shi)間等(deng)，所(suo)以(yi)可(ke)能(neng)存(cun)在(zai)檢(jian)測(ce)不出(chu)的(de)情況。

6.         某些天(tian)然(ran)蛋(dan)白(bai)或重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)，包(bao)括原核(he)及真(zhen)核(he)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)，可(ke)能(neng)因為(wei)與本(ben)產(chan)品所使(shi)用的(de)檢測(ce)抗體(ti)及(ji)捕(bu)獲抗體(ti)不匹(pi)配，而(er)不被(bei)檢(jian)測(ce)出(chu)。

7.         建議使用新鮮樣本(ben)，保存(cun)時(shi)間過(guo)長可(ke)能(neng)會(hui)存(cun)在(zai)蛋(dan)白(bai)降(jiang)解或變性導致實(shi)驗結(jie)果偏(pian)差。

豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)ELISA試(shi)劑盒操作步驟

1.         加(jia)樣：分別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不加(jia)樣(yang)品及酶(mei)標(biao)試(shi)劑，其(qi)余各(ge)步操作相(xiang)同）、標準孔、待測(ce)樣(yang)品孔。在(zai)酶(mei)標(biao)包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)標(biao)準(zhun)品準確(que)加樣(yang)50μl，待測(ce)樣(yang)品孔中(zhong)先加樣品稀(xi)釋(shi)液(ye)40μl，然(ran)後再(zai)加待測(ce)樣(yang)品10μl（樣品*終稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將樣品加於酶(mei)標(biao)板(ban)孔(kong)底(di)部，盡(jin)量不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁，輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。

2.         溫(wen)育(yu)：用封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後置37℃溫(wen)育(yu)30分鐘(zhong)。  

3.         配液(ye)：將20倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)用蒸餾(liu)水20倍(bei)稀(xi)釋(shi)後備(bei)用

4.         洗滌(di)：小心揭(jie)掉封(feng)板(ban)膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每(mei)孔加滿洗滌(di)液(ye)，靜(jing)置(zhi)30秒(miao)後棄(qi)去，如此(ci)重(zhong)復(fu)5次，拍幹(gan)。

5.         加酶(mei)：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除外。

6.         溫(wen)育(yu)：操作同(tong)3。

7.         洗滌：操作同(tong)5。

8.         顯色：每孔先加入顯色(se)劑A50μl，再(zai)加入(ru)顯色(se)劑B50μl，輕輕震蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光顯(xian)色(se)15分鐘(zhong).

9.         終(zhong)止：每(mei)孔(kong)加終(zhong)止液(ye)50μl，終(zhong)止反應（此(ci)時(shi)藍色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

10.     測(ce)定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長依序(xu)測(ce)量各孔的(de)吸光(guang)度（OD值）。 測(ce)定(ding)應(ying)在(zai)加終止液(ye)後15分鐘(zhong)以(yi)內(nei)進行(xing)。

註意：

1.         試劑準備(bei)：準備(bei)壹(yi)次(ci)實(shi)驗所需(xu)要(yao)的(de)酶(mei)標(biao)條(tiao)，其(qi)它的(de)可(ke)從(cong)微孔板(ban)上(shang)拆(chai)下，密封(feng)，按照(zhao)說明(ming)書(shu)要求保(bao)存(cun)，以(yi)備(bei)下次使用。

2.         加樣(yang)：實(shi)驗操作中(zhong)請使用壹(yi)次(ci)性的(de)吸頭(tou)，避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙染(ran)。加樣時(shi)註意不要(yao)有(you)氣泡(pao)，將樣品加於酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部，盡(jin)量不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁，輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。加樣(yang)或加試(shi)劑時(shi)，**個孔與(yu)*後壹(yi)個(ge)孔加樣(yang)之間的(de)時(shi)間間隔(ge)如果太大(da)，將會(hui)導致不同(tong)的(de)“預(yu)溫(wen)育(yu)”時(shi)間，從(cong)而(er)明顯(xian)地(di)影(ying)響到測(ce)量值的(de)準確(que)性及重(zhong)復(fu)性。因此，壹(yi)次(ci)加樣時(shi)間(包(bao)括標準(zhun)品及所(suo)有(you)樣品)*好(hao)控(kong)制在(zai)10分鐘(zhong)內。推薦(jian)設(she)置(zhi)復(fu)孔進(jin)行(xing)實(shi)驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防(fang)止樣(yang)品蒸發(fa)，實(shi)驗時(shi)請將加上(shang)蓋或覆膜(mo)的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)置(zhi)於濕(shi)盒內，以(yi)避(bi)免液(ye)體(ti)蒸(zheng)發(fa)，洗(xi)板(ban)後應盡(jin)快(kuai)進行下步操作，任(ren)何時(shi)侯都(dou)應(ying)避(bi)免酶(mei)標(biao)板(ban)處(chu)於幹(gan)燥(zao)狀態，同時(shi)應嚴(yan)格遵(zun)守(shou)給定(ding)的(de)溫(wen)育(yu)時(shi)間和(he)溫(wen)度。

4.         洗(xi)滌(di)：充(chong)分的(de)洗滌(di)非(fei)常(chang)重(zhong)要，在(zai)每次(ci)洗滌過(guo)程中(zhong)，都(dou)要(yao)將洗滌(di)液(ye)完(wan)全(quan)甩(shuai)幹(gan)。洗(xi)滌過(guo)程中(zhong)反應孔(kong)中(zhong)殘留的(de)洗滌(di)液(ye)應(ying)在(zai)濾(lv)紙(zhi)上拍幹(gan)，勿(wu)將濾紙(zhi)直接(jie)放(fang)入(ru)反應孔(kong)中(zhong)吸水，同時(shi)要消除(chu)板(ban)底(di)殘留的(de)液(ye)體(ti)和(he)手(shou)指印，避(bi)免影(ying)響*後的(de)酶(mei)標(biao)儀讀數。如果有(you)自(zi)動洗(xi)板(ban)機(ji)，應(ying)在(zai)熟練使(shi)用後再(zai)用到正(zheng)式實(shi) 驗過(guo)程中(zhong)。

5.         反應時(shi)間的(de)控(kong)制：加入(ru)底(di)物後請定(ding)時(shi)觀察反應孔(kong)的(de)顏色(se)變化(比如，每(mei)隔(ge)10分鐘(zhong)觀察壹(yi)次(ci))，如顏色(se)較(jiao)深，請提前加入終(zhong)止液(ye)終(zhong)止反應，避(bi)免反應過(guo)強(qiang)從(cong)而(er)影(ying)響酶(mei)標(biao)儀光密(mi)度讀數。

6.         底(di)物：底(di)物請(qing)避(bi)光保(bao)存(cun)，在(zai)儲(chu)存(cun)和(he)溫(wen)育(yu)時(shi)避(bi)免強(qiang)光(guang)直接(jie)照(zhao)射。

7.         如果(guo)實(shi)驗室內(nei)濕(shi)度低於60%，推薦使用加濕(shi)器(qi)提高(gao)濕(shi)度水平(ping)。

 實(shi)驗流程

1.         實(shi)驗前標準品、試劑及樣本(ben)的(de)準備(bei)；

2.         加(jia)樣(yang)（標準品及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50ul，37℃孵(fu)育(yu)半小(xiao)時(shi)；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加(jia)入(ru)顯色液(ye)A，B各(ge)50ul,37℃孵育(yu)顯色15分鐘(zhong)

5.         加(jia)終止液(ye)50μL，立(li)即(ji)450nm讀數。

6.    計算

豬(zhu)調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)ELISA試(shi)劑盒計算

各標(biao)準(zhun)品及樣(yang)本(ben)O.D.值扣(kou)除空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值後作圖(tu)(七(qi)點(dian)圖(tu))，如設(she)置(zhi)復(fu)孔，則(ze)應(ying)取(qu)其(qi)平均(jun)值計算。以(yi)標(biao)準品的(de)濃度為(wei)縱坐(zuo)標(或對數(shu)坐(zuo)標)，O.D.值(zhi)為(wei)橫坐(zuo)標(或對數(shu)坐(zuo)標），繪(hui)出標準曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方(fang)程式(shi)應(ying)依回(hui)歸方(fang)程計算的(de)R2值來(lai)定，以(yi)R2值(zhi)越(yue)趨(qu)近於1為(wei)好(hao))。推(tui)薦(jian)使(shi)用專(zhuan)業制(zhi)作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行分析(xi)，如(ru)curve expert 1.30，根據(ju)樣品O.D.值，由(you)標(biao)準曲(qu)線(xian)查出相應(ying)的(de)濃度，乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)；或用標準(zhun)物的(de)濃度與O.D.值(zhi)計算出(chu)標(biao)準曲(qu)線(xian)的(de)回(hui)歸方(fang)程式(shi)，將樣品的(de)O.D.值代(dai)入方(fang)程式(shi)，計算出(chu)樣(yang)品濃度，再(zai)乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)，即(ji)為(wei)樣品的(de)實(shi)際濃度。

 特(te)異性

本(ben)試劑盒用於檢測(ce)豬(zhu)調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)，經檢測(ce)與(yu)其(qi)它相似(si)物(wu)質(zhi)無(wu)明(ming)顯交(jiao)叉(cha)反應。

由(you)於受到技(ji)術及(ji)樣(yang)本(ben)來源(yuan)的(de)限(xian)制(zhi)，不可(ke)能(neng)完成(cheng)對(dui)所有(you)相關(guan)或相似(si)物(wu)質(zhi)交(jiao)叉(cha)反應檢(jian)測(ce)，因此本(ben)試劑盒有(you)可(ke)能(neng)與未(wei)經檢測(ce)的(de)其(qi)它物質(zhi)有(you)交(jiao)叉(cha)反應。

 精密度

精密度用樣品測(ce)定(ding)值(zhi)的(de)變異系(xi)數CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內差：取(qu)同批次(ci)試劑盒對低、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值樣(yang)本(ben)進行(xing)定量檢測(ce),每(mei)份(fen)樣(yang)本(ben)連續(xu)測(ce)定(ding)20 次(ci)，分別(bie)計算不同(tong)濃(nong)度樣本(ben)的(de)平均(jun)值及(ji)SD值。

批(pi)間差：選取(qu)3個不同(tong)批(pi)次(ci)的(de)試劑盒分別(bie)對低、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值樣(yang)本(ben)進行(xing)定量測(ce)定(ding)，每(mei)個(ge)樣本(ben)使用同壹(yi)試(shi)劑盒重(zhong)復(fu)測(ce)定(ding)8次(ci)，分別(bie)計算不同(tong)濃(nong)度樣本(ben)的(de)平均(jun)值及(ji)SD值。

批(pi)內(nei)差： CV<10%

批間差： CV<12%

豬調(tiao)節激(ji)活正(zheng)常(chang)T-細胞表(biao)達分泌因子(zi)(RANTES)ELISA試(shi)劑盒穩定性

經測(ce)定(ding)，試(shi)劑盒在有(you)效期(qi)內按推薦溫(wen)度保存(cun)，其(qi)活性降低(di)率(lv)小(xiao)於5%。

為(wei)減小(xiao)外部(bu)因素對(dui)試(shi)劑盒破(po)壞前後檢測(ce)值(zhi)的(de)影(ying)響，實(shi)驗室的(de)環境條件需(xu)盡(jin)量保持(chi)壹(yi)致，尤其(qi)是(shi)實(shi)驗室內(nei)溫(wen)度、濕(shi)度及溫(wen)育(yu)條件。其(qi)次由(you)同壹(yi)實(shi)驗員來(lai)進(jin)行操作可(ke)減(jian)少(shao)人(ren)為(wei)誤(wu)差。