產(chan)品名稱(cheng)：豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體(ti)外研(yan)究(jiu)使用(yong)，不(bu)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷!

豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒

本(ben)試劑盒運(yun)用(yong)雙抗體夾心(xin)ELISA法定量(liang)測定豬(zhu)血(xue)清、血漿、組(zu)織勻漿(jiang)、細胞裂(lie)解液(ye)、細(xi)胞培養(yang)上(shang)清液和其他生物(wu)液(ye)體(ti)中豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)含量(liang)。

 檢(jian)測(ce)範圍

1.563-100ng/mL

 *低(di)檢(jian)測限

0.60ng/mL

 實驗原理(li)

將(jiang)豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)抗(kang)體(ti)包(bao)被於96孔微孔板中(zhong)，制(zhi)成(cheng)固相(xiang)載體(ti)，向(xiang)微孔中分(fen)別(bie)加入(ru)標(biao)準品(pin)或(huo)標(biao)本(ben)，其中(zhong)的(de)豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)與(yu)連(lian)接(jie)於固相載(zai)體(ti)上(shang)的(de)抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)，然後加(jia)入(ru)生物(wu)素(su)化(hua)的(de)豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)抗(kang)體(ti)，將(jiang)未(wei)結(jie)合(he)的(de)生物(wu)素(su)化(hua)抗(kang)體(ti)洗(xi)凈後，加(jia)入(ru)HRP標(biao)記(ji)的(de)親(qin)和素(su)，再次(ci)徹(che)底洗(xi)滌後加(jia)入(ru)TMB底(di)物顯色。TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催(cui)化(hua)下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍色(se)，並在(zai)酸(suan)的(de)作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)*終(zhong)的(de)黃(huang)色(se)。顏色的(de)深淺和樣品中(zhong)的(de)豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)呈正(zheng)相(xiang)關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長(chang)下測(ce)定吸(xi)光(guang)度(O.D.值)，計(ji)算(suan)樣品濃(nong)度。

 試劑盒內(nei)容

豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒需自(zi)備的(de)設(she)備及試劑

1.         450±10nm濾光(guang)片的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)(建議儀(yi)器使用(yong)前提(ti)前(qian)預(yu)熱)

2.         單(dan)道或(huo)多(duo)道微量(liang)加液(ye)器及吸(xi)頭

3.         稀釋樣品的(de)EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾水(shui)或去(qu)離子(zi)水

5.         吸(xi)水(shui)紙(zhi)

6.         盛(sheng)放(fang)洗(xi)液的(de)容(rong)器

 試劑盒的(de)儲(chu)存(cun)及(ji)有效(xiao)期(qi)

1.         未(wei)開封的(de)試劑盒：所(suo)有試劑均(jun)按試劑瓶標(biao)簽上(shang)所(suo)示保存(cun)。請(qing)註(zhu)意，收(shou)到試劑盒後請(qing)盡(jin)快將(jiang)TMB 洗(xi)滌液(ye)，終(zhong)止(zhi)液(ye)保存(cun)於4℃，其他試劑保存(cun)於-20℃。

2.         使用(yong)後的(de)試劑盒：剩余(yu)試劑仍需按照試劑瓶標(biao)簽所(suo)示的(de)溫度保存(cun)，開封後的(de)酶(mei)標(biao)板要(yao)加(jia)幹(gan)燥劑(ji)後密(mi)封保存(cun)於-20℃，避免潮(chao)濕。

註(zhu)意：

試劑盒內(nei)酶(mei)標(biao)條可拆卸(xie)，按實驗需求(qiu)可分多(duo)次(ci)使用(yong)；使用(yong)後的(de)剩(sheng)余(yu)試劑盒建議在(zai)**實驗後 1個(ge)月(yue)內(nei)使用(yong)完(wan)畢。產(chan)品過(guo)期(qi)時(shi)間以(yi)盒(he)子(zi)上(shang)的(de)標(biao)簽為(wei)準(zhun)，保質(zhi)期(qi)內(nei)所(suo)有組(zu)分都(dou)確保(bao)是穩定的(de)。

豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒標(biao)本(ben)的(de)采(cai)集與(yu)保(bao)存(cun)

1.         血(xue)清：

將(jiang)收(shou)集於血清分離管的(de)全(quan)血(xue)標(biao)本(ben)在(zai)室(shi)溫放(fang)置(zhi) 2 小(xiao)時或 4^oC 過(guo)夜，然後 1000×g 離心(xin) 20 分鐘，取上(shang)清即可，或將(jiang)上(shang)清置(zhi)於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或肝(gan)素(su)作(zuo)為抗凝(ning)劑采(cai)集標(biao)本(ben)，並將(jiang)標(biao)本(ben)在(zai)采(cai)集後的(de) 30 分(fen)鐘內(nei)於 2-8^oC 1000×g 離心(xin) 15 分鐘，取上(shang)清即可檢測(ce)，或(huo)將(jiang)上(shang)清置(zhi)於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

3. 組(zu)織勻漿(jiang)：

1） 取(qu)適(shi)量(liang)組織塊，於預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗(xi)去(qu)除血液(ye)，稱(cheng)重後備用(yong)（組織塊較大需先(xian)剪碎(sui)後再勻漿）；

2） 可同時選(xuan)用(yong)多(duo)種勻(yun)漿方(fang)法達(da)到較好的(de)破(po)碎(sui)效(xiao)果：首先(xian)將(jiang)組(zu)織塊移(yi)入(ru)玻(bo)璃(li)勻漿(jiang)器，加入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進行(xing)充分研(yan)磨，該過(guo)程(cheng)需在(zai)冰(bing)上(shang)進行(xing)（有條件(jian)實驗室(shi)可選(xuan)用(yong)機器勻漿(jiang)）；得到的(de)勻(yun)漿(jiang)液(ye)可再利用(yong)超聲(sheng)破(po)碎(sui)或(huo)反復(fu)凍(dong)融(rong) 進壹步(bu)處(chu)理(li)（超聲(sheng)破(po)碎(sui)過(guo)程(cheng)中註(zhu)意冰(bing)浴(yu)降(jiang)溫；反復(fu)凍(dong)融(rong)法可重復(fu)2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備好的(de)勻(yun)漿(jiang)液(ye)於5000×g 離心(xin)5 分鐘，留(liu)取上(shang)清即可檢測(ce)。

4. 細(xi)胞裂(lie)解液(ye)：

1）貼(tie)壁細(xi)胞需要(yao)先(xian)用(yong)胰酶(mei)消(xiao)化(hua)，離心(xin)收(shou)集細胞（懸(xuan)浮(fu)細胞可直接(jie)離心(xin)收(shou)集）；

2）將(jiang)收(shou)集到的(de)細(xi)胞用(yong)冷PBS 洗(xi)3 次(ci)；

3）物(wu)理(li)方(fang)法裂(lie)解細(xi)胞（可先(xian)超聲(sheng)破(po)碎(sui)細(xi)胞，再反復(fu)凍(dong)融(rong)）：

i 超聲(sheng)破(po)碎(sui)：取(qu)適(shi)量(liang)PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，用(yong)壹定功(gong)率的(de)超聲(sheng)波(bo)處(chu)理(li)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，使細胞急(ji)劇(ju)震(zhen)蕩(dang)破(po)裂(lie)。

ii 反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)：將(jiang)待(dai)破(po)碎(sui)的(de)細(xi)胞在(zai)-20 ^oC 以(yi)下冰(bing)凍(dong)，室溫融(rong)解，反(fan)復(fu)3 次(ci)，使細胞溶(rong)脹破(po)碎(sui)。

4）將(jiang)標(biao)本(ben)於2-8 ^oC 1500×g 離心(xin)10 分鐘，收(shou)集上(shang)清備用(yong)。

5. 細(xi)胞培養(yang)上(shang)清或其它(ta)生物(wu)標(biao)本(ben)：

請(qing) 1000×g 離心(xin) 20 分鐘，取上(shang)清即可檢測(ce)，或(huo)將(jiang)上(shang)清置(zhi)於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

註(zhu)意：

1.         以(yi)上(shang)標(biao)本(ben)均(jun)需密(mi)封保存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應(ying)小於1周，-20^oC不(bu)應超過(guo)1個(ge)月(yue)，-80^oC不(bu)應超過(guo)2個(ge)月(yue)。

2.         標(biao)本(ben)使用(yong)前應(ying)緩(huan)慢(man)均(jun)衡至(zhi)室溫，不(bu)應加熱使之(zhi)融(rong)解。

3.         實驗前(qian)紅細(xi)胞裂(lie)解液(ye)必須用(yong)標(biao)準品(pin)稀釋液稀釋。

豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒試劑準備

1.         使用(yong)前將(jiang)所(suo)有的(de)試劑和標(biao)本(ben)緩(huan)慢(man)均(jun)衡至(zhi)室溫(18-25oC)，試劑不(bu)能直接在(zai)37oC溶(rong)解。

2.         標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹(gan)品)：每瓶標(biao)準品(pin)加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)稀釋液1mL，蓋好後室(shi)溫靜置(zhi)大約10分(fen)鐘，同時反復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動以(yi)助溶(rong)解，其濃(nong)度為100ng/mL。準(zhun)備7個稀釋標(biao)準品(pin)的(de)EP管(guan)，每個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)準品(pin)稀釋液，如圖所(suo)示依(yi)次(ci)倍(bei)比(bi)稀釋成(cheng)不(bu)同的(de)梯(ti)度， 標(biao)準品(pin)稀釋液(0pg/mL)直接作(zuo)為空白孔。為保(bao)證(zheng)實驗結(jie)果有效(xiao)性(xing)，每次(ci)實驗請(qing)使用(yong)新的(de)標(biao)準品(pin)溶(rong)液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌液(ye)：用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或去(qu)離子(zi)水將(jiang)20mL濃(nong)洗(xi)滌液(ye)稀釋至(zhi)600mL，進行(xing)30倍稀釋。

標(biao)本(ben)處(chu)理(li)

1.         本(ben)公司(si)只對試劑盒本(ben)身負責，不(bu)對因使用(yong)該試劑盒所(suo)造(zao)成(cheng)的(de)樣本(ben)消耗負責，請(qing)使用(yong)者使用(yong)前充(chong)分(fen)考(kao)慮(lv)到樣本(ben)的(de)可能使用(yong)量(liang)，預留(liu)充足(zu)的(de)樣本(ben)。

2.         實驗前(qian)應預(yu)測標(biao)本(ben)含量(liang)，如果(guo)標(biao)本(ben)濃度過(guo)高，應對(dui)標(biao)本(ben)進行(xing)稀釋，使稀釋後的(de)標(biao)本(ben)符(fu)合(he)試劑盒的(de)檢(jian)測(ce)範(fan)圍，計(ji)算時(shi)再乘以(yi)相(xiang)應(ying)的(de)稀釋倍數(shu)。

3.         若(ruo)所(suo)檢(jian)樣本(ben)不(bu)包(bao)含在(zai)說(shuo)明(ming)書(shu)所(suo)列(lie)樣本(ben)之(zhi)中，建議進行(xing)預實驗驗證(zheng)其有效(xiao)性(xing)，並(bing)註(zhu)意留(liu)存(cun)樣本(ben)。

4.         使用(yong)化(hua)學(xue)裂(lie)解液(ye)制(zhi)備的(de)組(zu)織勻漿(jiang)或細胞提取(qu)液可能會(hui)由(you)於某些化(hua)學(xue)物質(zhi)的(de)引(yin)入(ru)導致(zhi)  ELISA實驗結(jie)果偏(pian)差。

5.         若(ruo)樣本(ben)為細(xi)胞培養(yang)上(shang)清，因該類樣本(ben)幹(gan)擾因素(su) 較多(duo)，如(ru)：細(xi)胞狀態(tai)、細胞數(shu)量(liang)、采(cai)樣時間等(deng)，所(suo)以(yi)可能存(cun)在(zai)檢(jian)測不(bu)出(chu)的(de)情(qing)況(kuang)。

6.         某些天然蛋(dan)白(bai)或(huo)重組蛋(dan)白(bai)，包(bao)括原核及(ji)真核重組蛋(dan)白(bai)，可能因為(wei)與(yu)本(ben)產品(pin)所(suo)使用(yong)的(de)檢(jian)測(ce)抗(kang)體及捕獲抗(kang)體(ti)不(bu)匹配，而(er)不(bu)被檢測出(chu)。

7.         建議使用(yong)新鮮樣本(ben)，保存(cun)時(shi)間過(guo)長(chang)可能會(hui)存(cun)在(zai)蛋(dan)白(bai)降(jiang)解或(huo)變性(xing)導致(zhi)實驗結(jie)果偏(pian)差。

豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

1.         加(jia)樣：分別(bie)設(she)空白孔（空白對照孔不(bu)加樣品及(ji)酶(mei)標(biao)試劑，其余(yu)各(ge)步(bu)操作(zuo)相同）、標(biao)準孔、待(dai)測樣品孔。在(zai)酶(mei)標(biao)包(bao)被板上(shang)標(biao)準品(pin)準(zhun)確加(jia)樣50μl，待(dai)測樣品孔中先(xian)加樣品稀釋液40μl，然後再加待(dai)測樣品10μl（樣品*終(zhong)稀釋度為5倍(bei)）。加(jia)樣將(jiang)樣品加(jia)於酶(mei)標(biao)板孔底部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及孔壁，輕輕晃(huang)動混(hun)勻。

2.         溫育：用(yong)封板膜(mo)封板後置(zhi)37℃溫育30分鐘。  

3.         配液：將(jiang)20倍(bei)濃縮(suo)洗(xi)滌液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)20倍稀釋後備用(yong)

4.         洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封板膜(mo)，棄去(qu)液體，甩幹(gan)，每孔加滿(man)洗(xi)滌液(ye)，靜置(zhi)30秒後棄去(qu)，如此重復(fu)5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。

5.         加(jia)酶(mei)：每孔加入(ru)酶(mei)標(biao)試劑50μl，空白孔除外(wai)。

6.         溫育：操作(zuo)同3。

7.         洗(xi)滌：操(cao)作(zuo)同5。

8.         顯(xian)色(se)：每孔先(xian)加入(ru)顯(xian)色劑A50μl，再加入(ru)顯(xian)色劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻，37℃避(bi)光顯色15分鐘.

9.         終(zhong)止(zhi)：每孔加終(zhong)止(zhi)液(ye)50μl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應（此時(shi)藍(lan)色立(li)轉黃(huang)色）。

10.     測(ce)定：以(yi)空白空調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序測量(liang)各孔的(de)吸(xi)光(guang)度（OD值）。 測(ce)定應(ying)在(zai)加(jia)終(zhong)止(zhi)液(ye)後15分(fen)鐘以(yi)內(nei)進行(xing)。

註(zhu)意：

1.         試劑準備：準(zhun)備壹次(ci)實驗所(suo)需要(yao)的(de)酶(mei)標(biao)條，其它(ta)的(de)可從(cong)微孔板上(shang)拆下，密(mi)封，按照說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求保存(cun)，以(yi)備下次(ci)使用(yong)。

2.         加(jia)樣：實驗操(cao)作(zuo)中請使用(yong)壹次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭，避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。加(jia)樣時註(zhu)意不(bu)要有氣(qi)泡(pao)，將(jiang)樣品加(jia)於酶(mei)標(biao)板底(di)部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及孔壁，輕輕晃(huang)動混(hun)勻。加(jia)樣或加(jia)試劑時，**個孔與(yu)*後壹(yi)個(ge)孔加樣之(zhi)間的(de)時(shi)間間隔如果太大，將(jiang)會(hui)導致(zhi)不(bu)同的(de)“預(yu)溫育”時間，從(cong)而(er)明(ming)顯(xian)地影響(xiang)到測量(liang)值的(de)準(zhun)確性(xing)及(ji)重復(fu)性(xing)。因此(ci)，壹(yi)次(ci)加(jia)樣時間(包(bao)括標(biao)準品(pin)及(ji)所(suo)有樣品)*好(hao)控制(zhi)在(zai)10分(fen)鐘內(nei)。推(tui)薦(jian)設(she)置(zhi)復(fu)孔進行(xing)實驗。

3.          溫育：為(wei)防止(zhi)樣品蒸(zheng)發，實驗時(shi)請將(jiang)加(jia)上(shang)蓋或覆(fu)膜(mo)的(de)酶(mei)標(biao)板置(zhi)於濕盒內(nei)，以(yi)避(bi)免液(ye)體(ti)蒸(zheng)發，洗(xi)板後應(ying)盡(jin)快進行(xing)下步(bu)操作(zuo)，任何時(shi)侯(hou)都(dou)應(ying)避(bi)免酶(mei)標(biao)板處(chu)於幹(gan)燥狀(zhuang)態(tai)，同時應嚴格(ge)遵(zun)守給(gei)定的(de)溫育時間和溫度。

4.         洗(xi)滌：充(chong)分(fen)的(de)洗(xi)滌非(fei)常(chang)重要，在(zai)每次(ci)洗(xi)滌過(guo)程(cheng)中，都(dou)要(yao)將(jiang)洗(xi)滌液(ye)完(wan)全甩幹(gan)。洗(xi)滌過(guo)程(cheng)中反(fan)應孔中殘(can)留(liu)的(de)洗(xi)滌液(ye)應在(zai)濾紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹(gan)，勿(wu)將(jiang)濾紙(zhi)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)反(fan)應孔中吸(xi)水(shui)，同時要消除(chu)板底殘留(liu)的(de)液(ye)體(ti)和手指印(yin)，避(bi)免影響(xiang)*後的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數(shu)。如果(guo)有自(zi)動洗(xi)板機，應在(zai)熟練使用(yong)後再用(yong)到正式(shi)實 驗過(guo)程(cheng)中。

5.         反(fan)應(ying)時間的(de)控制(zhi)：加(jia)入(ru)底(di)物後請(qing)定時(shi)觀察(cha)反應(ying)孔的(de)顏色變化(hua)(比(bi)如(ru)，每隔10分(fen)鐘觀察(cha)壹次(ci))，如(ru)顏色較深，請提前(qian)加入(ru)終(zhong)止(zhi)液(ye)終(zhong)止(zhi)反(fan)應，避免反(fan)應(ying)過(guo)強從(cong)而(er)影響(xiang)酶(mei)標(biao)儀(yi)光(guang)密(mi)度讀數(shu)。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請避光(guang)保存(cun)，在(zai)儲(chu)存(cun)和溫育時避免強光直接(jie)照射(she)。

7.         如(ru)果(guo)實驗室(shi)內(nei)濕度低於60%，推(tui)薦(jian)使用(yong)加濕器提高濕度水平(ping)。

 實驗流(liu)程(cheng)

1.         實驗前(qian)標(biao)準品(pin)、試劑及樣本(ben)的(de)準(zhun)備；

2.         加(jia)樣（標(biao)準品(pin)及(ji)樣本(ben)）50μL，37℃孵育30分鐘；

3.         洗(xi)板5次(ci)，加(jia)酶(mei)標(biao)試劑50ul，37℃孵育半小(xiao)時(shi)；

4.         洗(xi)板5次(ci)；加(jia)入(ru)顯(xian)色液A，B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘

5.         加(jia)終(zhong)止(zhi)液(ye)50μL，立(li)即450nm讀(du)數(shu)。

6.    計(ji)算(suan)

豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒計算(suan)

各(ge)標(biao)準品(pin)及(ji)樣本(ben)O.D.值扣除空白孔O.D.值後作(zuo)圖(七點(dian)圖(tu))，如設(she)置(zhi)復(fu)孔，則應(ying)取(qu)其平(ping)均(jun)值計算(suan)。以(yi)標(biao)準品(pin)的(de)濃(nong)度為縱(zong)坐標(biao)(或對(dui)數(shu)坐標(biao))，O.D.值為(wei)橫(heng)坐標(biao)(或對(dui)數(shu)坐標(biao)），繪出(chu)標(biao)準曲(qu)線(*佳(jia)方(fang)程(cheng)式(shi)應(ying)依(yi)回(hui)歸方(fang)程(cheng)計算(suan)的(de)R2值(zhi)來(lai)定，以(yi)R2值(zhi)越(yue)趨近(jin)於1為好)。推(tui)薦(jian)使用(yong)專業制(zhi)作(zuo)曲線軟(ruan)件(jian)進行(xing)分析，如curve expert 1.30，根據樣品O.D.值(zhi)，由(you)標(biao)準曲(qu)線查(zha)出(chu)相(xiang)應的(de)濃(nong)度，乘以(yi)稀釋倍數(shu)；或用(yong)標(biao)準物(wu)的(de)濃(nong)度與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算(suan)出(chu)標(biao)準曲(qu)線的(de)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)式(shi)，將(jiang)樣品的(de)O.D.值(zhi)代入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi)，計(ji)算(suan)出(chu)樣品濃(nong)度，再乘以(yi)稀釋倍數(shu)，即為(wei)樣品的(de)實際濃度。

 特(te)異(yi)性(xing)

本(ben)試劑盒用(yong)於檢測豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)，經檢測(ce)與(yu)其它(ta)相似物(wu)質(zhi)無(wu)明(ming)顯(xian)交叉(cha)反(fan)應(ying)。

由(you)於受到技(ji)術(shu)及樣本(ben)來源的(de)限(xian)制(zhi)，不(bu)可能完(wan)成(cheng)對所(suo)有相(xiang)關或相(xiang)似物(wu)質(zhi)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)檢(jian)測，因此(ci)本(ben)試劑盒有可能與(yu)未(wei)經(jing)檢(jian)測的(de)其它(ta)物質(zhi)有交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)。

 精(jing)密(mi)度

精(jing)密(mi)度用(yong)樣品測(ce)定值(zhi)的(de)變異(yi)系(xi)數(shu)CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內(nei)差：取(qu)同批次(ci)試劑盒對低(di)、中(zhong)、高值定值(zhi)樣本(ben)進行(xing)定量(liang)檢測(ce),每份(fen)樣本(ben)連續(xu)測(ce)定20 次(ci)，分(fen)別計(ji)算不(bu)同濃度樣本(ben)的(de)平(ping)均(jun)值及SD值(zhi)。

批(pi)間差：選(xuan)取(qu)3個不(bu)同批次(ci)的(de)試劑盒分別(bie)對(dui)低(di)、中、高值定值(zhi)樣本(ben)進行(xing)定量(liang)測定，每個樣本(ben)使用(yong)同壹試劑盒重復(fu)測(ce)定8次(ci)，分(fen)別計(ji)算不(bu)同濃度樣本(ben)的(de)平(ping)均(jun)值及SD值(zhi)。

批(pi)內(nei)差： CV<10%

批(pi)間差： CV<12%

豬(zhu)防禦素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒穩定性(xing)

經(jing)測(ce)定，試劑盒在(zai)有效(xiao)期(qi)內(nei)按推(tui)薦(jian)溫度保存(cun)，其活(huo)性(xing)降(jiang)低(di)率小(xiao)於5%。

為(wei)減(jian)小外部因素(su)對(dui)試劑盒破(po)壞(huai)前(qian)後檢(jian)測(ce)值的(de)影響(xiang)，實驗室(shi)的(de)環(huan)境(jing)條件(jian)需盡(jin)量(liang)保持(chi)壹(yi)致(zhi)，尤其是實驗室(shi)內(nei)溫度、濕度及溫育條件(jian)。其次(ci)由(you)同壹實驗員來進行(xing)操作(zuo)可減少(shao)人(ren)為誤(wu)差(cha)。